👈👈👈به صورت خلاصه اگر بخوام بگم در صورتی که شما روی ژلتون دو تا باند دیدین یعنی هم کارتون رو دست انجام دادین و هم ژن مورد نظرتون توی هست و تکثیر شده، اگر فقط باند ژن خانه دار رو دیدین یعنی کارتون رو درست انجام دادین ولی ژن مورد نظرتون توی سلول وجود نداره و تکثیر نشده. و در نهایت اگر اصلا هیچ باندی ندیدین باید حتما به روش انجام PCR و یا موادتون بخصوص طراحی پرایمرتون شک کنین.
🤓البته با توجه به اینکه پرایمر های طراحی شدتون برای ژن هدف و ژن خانه دار متفاوت است اگر باندی از ژن هدفتون ندیدین ممکن هست که تو طراحی پرایمر ژن هدفتون اشتباه کرده باشین اما حداقل مطمئن هستین که پروسه رو درست انجام دادین. 

✅️راستی! هنوز مواد لازم برای انجام این مدل PCR رو با هم بررسی نکردیم:
توالی پرایمر که اختصاصا برای قطعه ژنی موردنظرمون سنتز شده. (یادتون باشه که هم برای ژن هدف و هم برای ژن خانه دارتون باید پرایمر داشته باشین مستر میکس واکنش که حاوی تمام موادی است که برای انجام PCR نیازه. مثل آنزیم Taq Polymerase، تمام انواع بازهای مورد نظر DNA ( Dntp ها)و بافر و نمک های یونی لازم.
و درنهایت DNA استخراج شده از سلول هدفتون که حتما قبلش باید با دستگاه نانودراپ کیفیتش رو سنجیده باشین.
✅️دستگاه هایی همکه احتیاج داریم دستگاه ترموسایکلر PCR،  دستگاه ژل الکتروفورز و دوربین برای عکس برداری از ژلمون هست. 
چون فعلا میخوایم انواع PCR رو با هم بررسی کنیم پروسه انجام کار رو توضیح نمیدیم. اگر کسی هست اینجا که میخواد PCR معمولی بذاره و نیاز به پروتکل داره لطفا بهمون بگه تا به خاطر ایشون پروتکل کامل انجام تست PCR معمولی را بذاریم.

#PCR #RealTimePCR

Rtpmed.com